凍結マウスFeeder細胞の起こし方&使い方

まず0.1%ゼラチン溶液を準備する。1%ゼラチン溶液を作成/ストックしておき、PBSで希釈する。フィルター滅菌し保管する。

1. 用いるプレートに0.1%ゼラチン溶液を入れ（6 wellなら1ml、12wellなら500μl、48wellなら300μl/well）、インキュベーター内に15分以上置く。

2. 細胞を解凍し、撒く培地の量でサスペンド、ゼラチン溶液を除去したのち全量を各wellに一気に撒く（wellが小さければ小さいほど、使う量でサスペンドし一気に撒くほうがいい）。5分ほど静置してから状態を確認しインキュベーターに入れる。

3. 翌日以降にfeederとして使用する。１〜２週間程度（？）もつ。

注）マウスとヒト等ではfeederの細胞数を変える必要がある。

　マウスの場合は2〜3×106 cells / plate全体が目安

　ヒトの場合（primed型）は上記の半分の1.5×106 cells / plate全体が目安